sadržaj
ELISA test: koji je princip?
Definicija: šta je ELISA test?
Tehnika testa imunoapsorpcije povezanih enzima-na engleskom Enzime-Linked Immuno Assay-ili ELISA test je imunološki test koji omogućava otkrivanje ili ispitivanje molekula u biološkom uzorku. Konceptualizirali su ga i razvili dva švedska naučnika, Peter Perlmann i Eva Engvall sa Univerziteta u Stockholmu 1971. godine.
Molekuli ispitani ELISA metodom općenito su proteini. I uzorci uključuju tekuće biološke materijale -plazmu, serum, urin, znojenje -, podlogu ćelijske kulture ili rekombinantni protein -protein koji proizvodi ćelija čiji je genetski materijal promijenjen genetskom rekombinacijom -pročišćen u rastvor.
ELISA test se uglavnom koristi u imunologiji za otkrivanje i / ili mjerenje prisutnosti proteina, antitijela ili antigena u uzorku. Ovaj serološki test posebno otkriva antitijela koja tijelo proizvodi kao odgovor na virusnu kontaminaciju.
Princip ELISA testa na zarazne bolesti
Korištenje antitijela za dijagnosticiranje zaraznih bolesti predstavlja specifičnu i brzu metodu. ELISA tehnika je imuno-enzimska tehnika koja omogućava da se iz biološkog uzorka vizualiziraju reakcije između antigena-tijela koje živi organizam smatra stranim-i antitijela pomoću reakcije u boji koju proizvodi enzimski marker- općenito alkalna fosfataza i peroksidaza - prethodno pričvršćene na antitijelo. Reakcija u boji potvrđuje identifikaciju izolirane bakterije ili prisutnost željenog virusa, a intenzitet boje ukazuje na količinu antigena ili antitijela u danom uzorku.
Različite vrste ELISA testova
Postoje četiri glavne vrste ELISA testa:
- ELISA direktni, omogućuje otkrivanje ili mjerenje antitijela. Koristi samo primarno antitijelo;
- Posredni ELISA test, najčešće korištena, također omogućuje otkrivanje ili ispitivanje antitijela. Koristi sekundarno antitijelo koje mu daje bolju osjetljivost od direktnog ELISA -e;
- ELISA na takmičenju, dopušta doziranje antigena. Proizvedeno konkurencijom za obveznice, ne koristi enzime;
- ELISA "u sendviču", dopušta doziranje antigena. Ova tehnika se obično koristi u istraživanju.
Koristeći ELISA test
ELISA test se koristi za:
- Pronađite i izmjerite antitijela u serologiji za dijagnostiku zaraznih bolesti: virusologiju, parazitologiju, bakteriologiju itd .;
- Doziranje proteina u niskim koncentracijama: specifične doze određenih proteina plazme (imunoglobulin E (IgE), feritin, proteinski hormoni itd.), Tumorskih markera itd .;
- Dozirajte male molekule: steroidne hormone, hormone štitnjače, lijekove ...
Najčešći slučajevi: Covid-19, denga, HIV, Lyme, alergije, trudnoća
ELISA test se posebno koristi za dijagnosticiranje mnogih zaraznih bolesti:
Spolno prenosive bolesti (SPB)
Uključujući hepatitis, sifilis, klamidiju i HIV. Preporučene od strane zdravstvenih vlasti, to je glavni skrining test na AIDS: on pokazuje prisutnost anti-HIV antitijela i antigena p24 šest tjedana nakon infekcije.
Regionalne ili endemske bolesti
Žuta groznica, bolest Marburg virusa (MVM), Ladengue, lajmska bolest, Chikungunya, groznica Rift Valley, ebola, Lassa groznica itd.
Covid-19
Kako bi se proveo više od 2 do 3 sedmice nakon pojave simptoma, ELISA test omogućava identifikaciju, za manje od sat vremena, prisutnosti antitijela na SARS-CoV-2.
Virusni patogeni koji uzrokuju prenatalne infekcije
Na primjer, toksoplazmoza, rubeola, citomegalovirus, herpes simpleks.
Ostali slučajevi
Ali također je pronašao primjene u otkrivanju:
- Trudnoće;
- Autoimune bolesti;
- Alergeni u hrani: kvantitativno određivanje ukupnih imunoglobulina E (IgE) pomaže u procjeni i liječenju alergija;
- Hormonski poremećaji;
- Tumorski markeri;
- Biljni virusi;
- I još mnogo toga
Pouzdanost testa na Covid-19
Kao dio otkrivanja antitijela na SARS-CoV-2, pilot studija koju su u kolovozu 2020. proveli Institut Pasteur, CNRS, Inserm i Univerzitet u Parizu potvrđuje pouzdanost ELISA testa: oba ELISA testa testirala su upotrebu cijeli N protein SARS-CoV-2 (ELISA N) ili izvanstanični domen šiljaka virusa (S) kao ciljni antigeni. Ova tehnika omogućila bi identifikaciju antitijela u više od 90% slučajeva, s vrlo niskom stopom lažno pozitivnih od 1%.
Cijena i naknada za ELISA test
Elisa testovi koji se provode u laboratorijama za analizu na ljekarski recept koštaju oko 10 eura i 100 posto ih nadoknađuje zdravstveno osiguranje.
Provode se u besplatnim informacijskim, skrining i dijagnostičkim centrima (CeGIDD) i mogu biti besplatni za HIV i SARS-CoV-2.